川村グループ

HIV感染のリスクは性感染症（STD）により上昇することが知られている。STDは細菌、ウイルス、真菌などの感染であり、これら病原体の生体への侵入は樹状細胞（DC）上に存在するToll-like receptor（TLR）により感知されている。
近年、HIVの感染ターゲット細胞は樹状細胞の亜型である皮膚・粘膜ランゲルハンス細胞（LC)であることが証明された。

以上２つの背景より、STDの原因病原体は皮膚・粘膜内LC上に発現されるTLRを刺激し、HIV感染LCのウイルス産生を増加させることで宿主のHIV感染を促進させる、と仮説を立て研究を進めている。

我々は、ヒト皮膚LCのキャラクターをもち、広く用いられているヒト単球由来LC-like DC、あるいは当科手術で患者同意のもと得られた不要・余剰な皮膚よりepidermal LCを単離し、以下のことを証明した。

FACSを用い、LCはTLR1, TLR2, TLR3, TLR6を発現していること；　皮膚・粘膜LCはSTDの原因病原体のうち、グラム陽性球菌あるいは何らかのウイルスを認識する可能性を示唆する
LCに発現するTLR1-3, 6は機能的であること；TLR ligands kit (TLR1～9 ligands、Invivogen®)をLCに添加し、
24時間後に活性化マーカーであるCD83/CD86の発現誘導能あるいはサイトカインの産生能を検討した
STDのHIV易感染性 (entry)あるいはHIV複製量（replication）への関与、機序；　LC-like DC, epidermal LCをHIVBa-L (R5HIV)に感染させる前後で、TLR ligands kitにて処理した。前処理したものはentry, 後処理したものはreplicationを反映することになる。１週間培養後、HIV感染LC数をHIV p24に対するモノクローナル抗体を用いてFACSで定量した。TLR2 ligandであるListeria monocytogenes （グラム陽性菌）、また同様にグラム陽性菌の菌体構成成分である、lipoprotein, LTA, PGNで処理した際に、無処理群に比べ有意にLCのHIV entry, replicationが増加することを確認した。
そのメカニズムとして、
TLR2 ligandはLC-like DCのCD4をup-regulationする (FACS)
TLR2 ligandは、レトロウイルス複製阻害因子であるAPOBEC3G/3Fの発現を低下させる (real-time PCR)